藥品生產(chǎn)后必須對其生產(chǎn)設備采取一定的程序進行清洗，防止藥物成分殘留到下一批產(chǎn)品中，形成交叉污染，從而影響下一批產(chǎn)品的質(zhì)量及安全性。清潔驗證是證實清洗程序合理性的必要技術手段。

 

WHO、EU、ICH、FDA及我國藥品GMP均對藥品生產(chǎn)清潔驗證提出了相關要求:
1）使用同一生產(chǎn)設備生產(chǎn)不同的產(chǎn)品，必須進行清潔驗證，確定可接受藥物殘留水平。
2）當同一設備僅生產(chǎn)一種產(chǎn)品時，不涉及交叉污染，無需開展系統(tǒng)的殘留物限度清潔驗證，通常通過目視法檢查設備表面無可見殘留物并保障微生物水平即可。

 

清潔驗證的取樣方法主要有擦拭取樣法（直接取樣）和淋洗取樣法（間接取樣），為達到清潔目的，兩種方法可結(jié)合使用。通常根據(jù)待清潔品種各組成成分的清潔難易程度、溶解度和允許最大殘留量（MACO值）來確定需要清潔的組分。 

 

本文參照歐洲原料藥委員會（APIC）在原料藥工廠清潔驗證指南（2016.09）中給出的藥物活性成分殘留限度的確定方法，結(jié)合國內(nèi)清潔驗證限度確定相關文獻，對藥品生產(chǎn)設備清潔中活性成分殘留限度確認方法進行簡要歸納，并初步擬定待清潔活性成分的分析檢測方法驗證方案。


 

在可以獲得可接受日暴露水平（ADE） 或允許日暴露量（PDE） 值時 ,可采用ADE或PDE值計算最大允許殘留量（MACO）。 

首先，計算ADE值或PDE值，計算公式如下：

其次，根據(jù)ADE值或PDE值計算MACO值，計算公式如下：

 

當多品種共線生產(chǎn)時，可以選擇ADE或PDE值較小的品種作為上一產(chǎn)品，選擇MBS/TDD比值最小的品種作為生產(chǎn)的下一產(chǎn)品。


 

如果可以獲得有限毒性數(shù)據(jù)和日治療劑量（TDD）值，可以采用本計算方式，就原料藥而言，該公式適用于原料藥生產(chǎn)工藝A更換到原料藥生產(chǎn)工藝B的情況。計算公式如下：

如果無法獲得其它數(shù)據(jù)（例如， ADE、 OEL、 TDD等值），僅能獲得半數(shù)致死量數(shù)據(jù)（例如化學物質(zhì)、中間體、清潔劑等）， MACO可以基于半數(shù)致死量數(shù)據(jù)來計算 。 

 

首先，計算NOEL值（無可見影響水平）：

其次，根據(jù)NOEL值計算MACO值：

 

可利用以下公式，基于一個通用限度確定MACO限度，單位為ppm。

 

例如，就原料藥而言，通用限度為100ppm時，MACO為最小批量（MBS）的0.01%；通用限度為10ppm時，MACO為最小批量（MBS）的0.001%。

通過上述公式，確定MACO值后，即可通過如下公式，計算擦拭法及淋洗法的殘留可接受標準。

注意，上述公式中擦拭限度計算的“總表面積”可為共線產(chǎn)品共用設備的累積面積。 

 

另外，關于一般限度10ppm，即10μg/ml或10mg/kg，對于液體制劑設備的清潔驗證標準確定，淋洗法限度即為10μg/ml。設下一批產(chǎn)品的生產(chǎn)批量為B（ml或kg），上批產(chǎn)品與下批產(chǎn)品的設備共用累積接觸面積為D（cm²），為確保安全，應除以安全因子F（可依據(jù)藥物生理活性水平確定，通常分為1000、100、10三個級別），可按照如下過程計算擦拭法殘留限度Ld。

 

根據(jù)各公司所生產(chǎn)產(chǎn)品的屬性不同（例如，毒性、藥物活性等），從上一產(chǎn)品帶入下一產(chǎn)品中的污染物質(zhì)最大濃度通用上限通常設定為5~500ppm（原料藥設定為100ppm較為常見，注射劑可設定為10ppm）。

 

以上主要給出了4種藥物殘留限度的計算標準，其中第一種（基于健康數(shù)據(jù)）及第三種（基于半數(shù)致死量）方法更為科學，但因ADE、PDE值或LD50值難以明確，故用之較少，而第二種（基于日治療劑量）及第四種（基于一般限度）方法更為常用。因此，在確定殘留限度時，應綜合評比上述幾種方法，基于最大程度上降低交叉污染的原則，選擇最為合適的結(jié)果作為清潔驗證的最終可接受標準。

 

在正式開展清潔驗證之前，需進行針對性分析方法的開發(fā)與驗證。通常選擇靈敏度較高的方法，如高效液相色譜法、氣相色譜法、紫外分光光度法等。首選可定量的檢測方法，也可選擇限度檢測方法。一般情況下，可以直接選擇待清潔品種質(zhì)量標準中規(guī)定的含量測定方法。所選用的分析方法均需按照《中國藥典》（2020年版）四部通則9101 分析方法驗證指導原則進行驗證。

制劑清潔驗證分析方法主要驗證項目及可接受標準如下：

 

擦拭法清潔驗證分析方法驗證



 

備注：

 

• 擦拭法準確度試驗樣品回收過程：將配制好的回收率考察溶液，定量添加至取樣板表面（根據(jù)設備情況確定取樣板材質(zhì)，規(guī)格通常為5cm×5cm），使取樣板風干，按照擬定方法用棉簽擦拭取樣板表面，照供試品溶液制備方法制備樣品溶液。

• 擦拭取樣操作方法：用溶劑潤濕藥簽，并將其靠在溶劑瓶邊擠壓，以去除多余的溶劑。將藥簽頭按在取樣表面上，用力使其稍彎曲，平穩(wěn)而緩慢地擦拭取樣表面，在向前移動的同時，將其從一邊移動到另一邊。擦拭的過程應覆蓋整個取樣表面，然后翻轉(zhuǎn)藥簽，讓其另一側(cè)也進行擦拭，但其方向應與前次垂直。
  
   

擦拭法取樣藥簽擦拭方法示例如下圖所示：

 

藥簽擦拭取樣示意圖

表  淋洗法清潔驗證分析方法驗證

注：該表中淋洗法準確度試驗考察的是檢測方法的準確度，并非淋洗回收率，接受標準可依據(jù)限度酌情調(diào)整。

 

A注射液清潔驗證殘留限度確認過程如下： 

無法獲得該注射液有效成分的ADE值或PDE值。 

全部共線產(chǎn)品中，B注射液的日用劑量最大，折算成體積為24ml，其最小生產(chǎn)批量為200L；共用設備累積接觸面積為367380cm²。

? 計算方法一：基于日治療劑量的可接受標準（先生產(chǎn)A產(chǎn)品，再生產(chǎn)B產(chǎn)品）

其中：

• MACO代表產(chǎn)品A能進入到產(chǎn)品B中的最大可接受量（mg）；

• MBS代表B產(chǎn)品的最小批量（ml或g）；

• TDDprevious代表A產(chǎn)品的日最小治療劑量（mg）；

• TDDnext代表在設備中生產(chǎn)B產(chǎn)品的最大日劑量（ml或g）；

• SF代表安全系數(shù)，可取1000。

注：MBS與TDDnext單位應統(tǒng)一。

對于本產(chǎn)品而言，產(chǎn)品A最小治療劑量按50mg計，產(chǎn)品B最小批量200000ml，最大日劑量為24ml。因此A注射液的有效成分能進入到B注射液中而不致引起風險的最大量為：

 

淋洗水按200L計，則淋洗水殘留限度416.67mg÷200L=2.083μg/ml 

共用設備累積接觸面積為367380cm²，

則擦拭殘留限度為416.67mg÷367380cm²=1.134μg/ cm²

 

? 計算方法二：基于半數(shù)致死量的可接受標準（先生產(chǎn)A產(chǎn)品，再生產(chǎn)B產(chǎn)品）

 

其中：

• MACO代表產(chǎn)品A能進入到產(chǎn)品B中的最大可接受量（mg）；

• MBS表產(chǎn)品B的最小批量（ml或g）；

• TDDnext代表產(chǎn)品B的最大日劑量（ml或g）；

• SF代表安全系數(shù)，一般取1000；

• LD50代表動物的半數(shù)致死量，證明動物（如小鼠）和給藥途徑（如靜注\口服）很重要（mg/kg）；

• BW代表一個成年人的平均體重，按70kg計算；2000代表一個經(jīng)驗常數(shù)。

注：MBSnext與TDDnext單位應統(tǒng)一。

對于本產(chǎn)品而言，產(chǎn)品A的小鼠半數(shù)致死量按照156mg/kg（靜脈注射）計，產(chǎn)品B的最小批量為200000ml，最大日劑量為24ml。因此A注射液的有效成分能進入到B注射液中而不致引起風險的最大量為：

淋洗水按200L計，則淋洗水殘留限度

45.500mg÷200L =0.228μg/ml 

共用設備累積接觸面積為367380cm²，

則擦拭殘留限度為45.500mg÷367380cm²=0.124μg/ cm²

 

? 計算方法三：一般限度，采用上批產(chǎn)品對下批產(chǎn)品的污染不得超過10ppm（10mg/kg）作為限定指標

最小批量200L，共用設備累積面積為367380cm² 

淋洗法限度：10ppm=0.001%=0.001g/100ml=10μg/ ml

擦拭法限度：

其中：

• B代表B產(chǎn)品的最小批量（ml）；

• D代表共用設備累積面積（cm2）； 

• F代表安全因子，一般取10。
  
   

采用上述3種計算方法中結(jié)果最小的限度值，即擦拭法殘留限度不得過0.124μg/ cm²，淋洗法殘留限度不得過0.228μg/ml。

清潔驗證是防止藥品生產(chǎn)過程中發(fā)生污染與交叉污染的重要措施之一，企業(yè)應針對藥品特性、生產(chǎn)設備特點等因素建立明確可控的清洗程序，并依據(jù)科學分析制定合理的殘留限度標準，建立并驗證科學的取樣及分析方法，以確保驗證結(jié)果準確，藥品生產(chǎn)穩(wěn)定可控，藥品質(zhì)量安全可靠。

 

-END-

 

關于我們：
       北京新領先（股票代碼：600222）成立于2005年，是一家面向全球提供藥學臨床前研究、臨床CRO和CDMO服務的高新技術企業(yè)，連續(xù)多年蟬聯(lián)“中國醫(yī)藥研發(fā)公司榜首”。公司總部位于北京中關村高新技術園區(qū)，同時在鄭州臨空生物園區(qū)建立了新藥篩選及檢測平臺、藥物評價平臺（動物房，GLP、AAALAC、CNAS認證）、大分子中試及大規(guī)模生產(chǎn)服務平臺、小分子CMC制劑研究生產(chǎn)平臺、細胞技術服務平臺和臨床CRO平臺等六大符合國際標準（FDA、EMA和NMPA GMP標準）的研發(fā)平臺，形成“新領先CXO”全產(chǎn)業(yè)鏈服務體系。仿創(chuàng)結(jié)合，雙引擎驅(qū)動，能夠為客戶提供藥學研發(fā)全生命周期的多元化服務。