導(dǎo)讀：
關(guān)注常規(guī)分析研究實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)問(wèn)題的深層次原因，通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證并解決問(wèn)題，建立最優(yōu)檢測(cè)方法。
摘要：
DMSO在酸性條件下，頂空加熱至80℃以上易分解為甲硫醚、二甲基二硫醚和甲硫醇。建立鹽酸鹽類原料藥的殘留溶劑檢測(cè)方法時(shí)，選用頂空進(jìn)樣方法測(cè)定時(shí)應(yīng)避免使用二甲基亞砜（DMSO）做稀釋劑，可選用水、N，N-二甲基甲酰胺等做稀釋劑，可有效避免引入雜質(zhì)峰干擾測(cè)定。
DMSO在酸性條件下加熱的反應(yīng)機(jī)理
方法建立背景：
我公司在檢測(cè)某鹽酸鹽類原料藥殘留溶劑時(shí)，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)采用頂空進(jìn)樣法測(cè)定（稀釋劑為二甲基亞砜），記錄的氣相色譜圖（圖1）中出現(xiàn)較大未知雜質(zhì)峰（非合成過(guò)程中引入溶劑種類）。
圖1 鹽酸鹽原料藥1號(hào)供試品GC色譜圖
原因排查：
1）文獻(xiàn)查詢
查詢二甲基亞砜穩(wěn)定性相關(guān)文獻(xiàn)，報(bào)道二甲基亞砜在酸性條件下高溫加熱會(huì)發(fā)生分解，分解產(chǎn)物主要是甲硫醚（沸點(diǎn)38℃）、二甲基二硫醚（沸點(diǎn)109℃）和甲硫醇（沸點(diǎn)123℃）。
匯總《中國(guó)藥典》2020年版二部收載的所有鹽酸類品種的殘留溶劑檢測(cè)方法（見(jiàn)表1），共收載了37個(gè)有殘留溶劑檢測(cè)項(xiàng)目的鹽酸鹽品種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，采用稀釋溶劑為N，N-二甲基甲酰胺的有13個(gè)、采用水為稀釋劑的有12個(gè)，采用二甲基亞砜為稀釋劑的有12個(gè)。有匯總結(jié)果可見(jiàn)約1/3品種采用二甲基亞砜做稀釋劑（頂空平衡溫度為80~100℃，平衡時(shí)間為20-30min）。說(shuō)明鹽酸鹽類品種的氣相實(shí)驗(yàn)條件選擇二甲基亞砜為稀釋劑是較為普遍的現(xiàn)象，但是是否“存在即合理”呢？這些品種檢測(cè)過(guò)程是否出現(xiàn)過(guò)較大未知雜質(zhì)峰，所選方法是否是最優(yōu)方法呢？讓我們繼續(xù)一探究竟。
2）實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證
調(diào)查公司其他在研鹽酸鹽類品種的殘留溶劑檢測(cè)圖譜，發(fā)現(xiàn)另外兩個(gè)鹽酸鹽品種的供試品氣相色譜圖中（詳見(jiàn)圖2和圖3），均出現(xiàn)未知雜質(zhì)峰。而對(duì)應(yīng)的對(duì)照品和空白溶劑中均無(wú)該未知雜質(zhì)峰，初步分析二甲基亞砜在酸性條件下80℃（常規(guī)頂空溫度）時(shí)即可能發(fā)生分解。
圖2 鹽酸鹽原料藥2供試品GC色譜圖
圖3 鹽酸鹽原料藥3供試品GC色譜圖
推測(cè)該未知雜質(zhì)由DMSO在酸性加熱條件反應(yīng)產(chǎn)生，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證實(shí)：
② 稱取鹽酸鹽原料藥1約500mg，加10ml二甲基亞砜溶解后，測(cè)得pH為2.2。
②量取二甲基亞砜約10ml，用鹽酸調(diào)節(jié)pH至2.2，精密量取1ml，置頂空瓶中，70℃平衡25min頂空進(jìn)樣，記錄氣相色譜圖（見(jiàn)圖4），由圖可見(jiàn)，在RT9.405min處出現(xiàn)與圖3供試品相同的未知雜質(zhì)峰。另取2ml進(jìn)行GC-MS分析，根據(jù)結(jié)構(gòu)推測(cè)9.4min和12.8min雜質(zhì)分別為二甲基甲硫醚和甲硫醇。
圖4 DMSO酸性條件下80℃頂空平衡25min進(jìn)樣的GC色譜圖
小結(jié)：經(jīng)上述實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證結(jié)果可知，二甲基亞砜在酸性條件下頂空常規(guī)條件下進(jìn)樣會(huì)發(fā)生分解，生成甲硫醚、二甲基二硫醚和甲硫醇等雜質(zhì)。鹽酸鹽類品種采用頂空法測(cè)定時(shí)應(yīng)避免使用二甲基亞砜做稀釋劑。
方法改善：
取鹽酸鹽品種2和3樣品適量，分別將稀釋劑更換為50%N，N-二甲基甲酰胺和N，N-二甲基甲酰胺，其他色譜條件不變，頂空進(jìn)樣，記錄色譜圖（圖5和圖6），由圖可見(jiàn)，未出現(xiàn)其他雜質(zhì)峰。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，方法專屬性強(qiáng)、準(zhǔn)確性高，重現(xiàn)性好。
圖5 更換50%DMF為稀釋劑的鹽酸鹽品種1的GC色譜圖
圖6 更換50%DMF為稀釋劑的鹽酸鹽品種2的GC色譜圖
其他注意事項(xiàng)小結(jié)：
1、鹽酸鹽類物料采用DMSO作溶劑時(shí)，應(yīng)避免加熱；在加熱條件下，DMSO會(huì)與鹽酸鹽發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生雜質(zhì)；頂空加熱至80℃左右即會(huì)發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生雜質(zhì)；
2、更換DMF作溶劑可改善此現(xiàn)象；但是有的鹽酸類原料藥在DMF中的溶解性不滿足測(cè)定要求時(shí)，可采用一定比例的DMF：水的混合溶液做溶劑。
3、藥典上約1/3鹽酸鹽品種采用水做稀釋劑，純水做溶劑會(huì)影響部分待測(cè)溶劑（比如甲醇）峰形。
附表：
附表1 Ch P二部鹽酸鹽品種殘留溶劑檢測(cè)信息匯總表
|
編號(hào) |
名稱 |
溶解度 |
溶劑 |
殘留溶劑 測(cè)定法 |
頂空平衡溫度 及時(shí)間 |
溶劑種類 |
|
1 |
鹽酸乙哌立松 |
在水中或甲醇中易溶 |
N，N-二甲基甲酰胺 |
頂空法 |
70℃ 15min |
丙酮、異丙醇、三氯甲烷 |
|
2 |
鹽酸文拉法辛 |
在水中易溶，在乙醇中溶解。 |
50% N，N-二甲基甲酰胺溶液 |
頂空法 |
80℃ 30min |
甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、異丙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃、環(huán)己烷、甲苯。 |
|
3 |
鹽酸艾司洛爾 |
在水中易溶，在乙醇或三氯甲醇中易溶，在乙酸乙酯中極微溶解。 |
N，N-二甲基乙酰胺 |
直接進(jìn)樣法 |
/ |
甲醇、乙醚、乙酸乙酯、甲苯 |
|
4 |
鹽酸頭孢甲肟 |
在甲酰胺中易溶，在甲醇中微溶，在水中極微溶解，在乙醇中不溶。 |
N，N-二甲基甲酰胺 |
頂空法 |
80℃ 30min |
四氫呋喃、二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯 |
|
5 |
鹽酸多巴酚丁胺 |
在水或無(wú)水乙醇中略溶，在三氯甲烷中幾乎不溶 |
N，N-二甲基甲酰胺 |
直接進(jìn)樣法 |
/ |
苯、丙酮 |
|
6 |
鹽酸安非他酮 |
在水、甲醇或乙醇中易溶，在乙酸乙酯中幾乎不溶 |
N，N-二甲基甲酰胺 |
頂空法 |
80℃ 30min |
乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷 |
|
7 |
鹽酸克林霉素磷酸酯 |
在乙醇中易溶，在水中溶解 |
N，N-二甲基甲酰胺 |
頂空法 |
90℃ 30min |
乙醇、乙酸乙酯、丙酮、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷 |
|
8 |
鹽酸阿米替林 |
在水、甲醇、乙醇或三氯甲烷中易溶。 |
N，N-二甲基甲酰胺 |
直接進(jìn)樣法 |
/ |
甲苯、四氫呋喃、異丙醇 |
|
9 |
鹽酸納美芬 |
在水或甲醇中易溶，在乙醇中溶解，在丙酮中極微溶解 |
N，N-二甲基甲酰胺 |
頂空法 |
80℃ 30min |
丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、四氫呋喃 |
|
10 |
鹽酸舍曲林 |
在甲醇或乙醇中溶解，在水中幾乎不溶 |
N，N-二甲基甲酰胺 |
頂空法 |
80℃ 30min |
甲醇、乙醇、乙酸乙酯、四氫呋喃、異丙醇、正丁醇 |
|
11 |
鹽酸氟西汀 |
在甲醇或乙醇中易溶，在水或三氯甲烷中微溶。 |
N，N-二甲基甲酰胺 |
頂空法 |
90℃ 40min |
甲醇、乙腈、正己烷、乙酸乙酯、甲苯 |
|
12 |
鹽酸維拉帕米 |
在甲醇、乙醇或三氯甲烷中易溶，在水中溶解。 |
N，N-二甲基甲酰胺 |
頂空法 |
90℃ 30min |
乙醇、丙酮、苯甲醛、二甲基亞砜、甲苯、三氯甲烷 |
|
13 |
鹽酸氮卓斯汀 |
在甲醇中略溶，在水或乙醇中微溶，在冰醋酸中溶解 |
50% N，N-二甲基甲酰胺 |
頂空法 |
85℃ 15min |
甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、 二氯甲烷 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
14 |
鹽酸二甲弗林 |
在水中易溶，在乙醇中溶解，在乙醚中幾乎不溶 |
水 |
頂空法 |
80℃ 30min |
無(wú)水乙醇 |
|
15 |
鹽酸川芎嗪 |
在水中易溶，在乙醇和三氯甲烷中溶解 |
水 |
頂空法 |
80℃ 30min |
丙酮 |
|
16 |
鹽酸丙帕他莫 |
在水中易溶，在乙醇中微溶，在丙酮幾乎不溶。 |
水 |
頂空法 |
80℃ 30min |
甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷 |
|
17 |
鹽酸左布比卡因 |
在乙醇中易溶，在水中溶解，在三氯甲烷中微溶。 |
水 |
頂空法 |
80℃ 30min |
異丙醇 |
|
18 |
鹽酸頭孢吡肟 |
在水中或甲醇中易溶，乙醇中微溶。 |
水 |
頂空法 |
70℃ 30min |
甲醇、丙酮 |
|
19 |
鹽酸米多君 |
在水中溶解，在甲醇中略溶，在丙酮或乙醚中幾乎不溶，在乙酸乙酯中不溶。 |
水 |
頂空法 |
80℃ 30min |
甲醇、乙腈 |
|
20 |
鹽酸阿普林定 |
在三氯甲烷中極易溶解，在水或乙醇中易溶 |
水 |
頂空法 |
80℃ 45min |
乙酸乙酯 |
|
21 |
鹽酸阿糖胞苷 |
在水中極易溶解，在乙醇中略溶，在乙醚中幾乎不溶 |
水 |
頂空法 |
80℃ 30min |
甲醇、乙醇 |
|
22 |
鹽酸表柔比星 |
在水或甲醇中溶解，在乙醇中微溶。 |
水 |
頂空法 |
80℃ 30min |
乙醇、丙酮、二氯甲烷 |
|
23 |
鹽酸環(huán)丙沙星 |
在水中溶解，在甲醇或乙醇中極微溶解，在丙酮、乙酸乙酯或二氯甲烷中幾乎不溶 |
水 |
頂空法 |
90℃ 30min |
甲苯、乙醇 |
|
|
|
|
|
|||
|
24 |
鹽酸曲馬多 |
在水中極易溶，在乙醇或三氯甲烷中易溶，在丙酮中微溶。 |
水 |
頂空法 |
90℃ 30 min |
異丙醇，二氧六環(huán) |
|
25 |
鹽酸曲美他嗪 |
在水中極易溶解，在冰醋酸中易溶，在甲醇中溶解，在乙醇中略溶。 |
水 |
頂空法 |
60℃ 45 min |
無(wú)水乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷、甲苯 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
26 |
鹽酸二氫埃托啡 |
在甲醇中溶解，在水中或乙醇中微溶 |
二甲基 亞砜 |
頂空法 |
100℃ 30min |
甲醇、乙醇、乙醚、苯 |
|
27 |
鹽酸托烷司瓊 |
在水中易溶，在甲醇中略溶，在乙醇中微溶，在三氯乙烷中幾乎不溶。 |
90%二甲基亞砜 水溶液 |
頂空法 |
85℃ 25 min |
正己烷、四氫呋喃、甲醇、二氯甲烷、乙醇、三氯甲烷、甲苯、N，N二甲基甲酰胺 |
|
28 |
鹽酸司來(lái)吉蘭 |
在水、甲醇或乙醇中易溶。 |
二甲基 亞砜 |
頂空法 |
90℃ 30min |
無(wú)水乙醇、無(wú)水乙醚、甲苯 |
|
29 |
鹽酸柔紅霉素 |
在水或甲醇中易溶，在乙醇中微溶，在丙酮中幾乎不溶 |
二甲基 亞砜 |
頂空法 |
80℃ 45min |
甲醇、乙醇、丁醇、丙酮、三氯甲烷 |
|
30 |
鹽酸氨溴索 |
在甲醇中溶解，在水中略溶，在乙醇中微溶。 |
80%二甲基亞砜 |
頂空法 |
80℃ 25min |
甲醇、無(wú)水乙醇、丙酮、二氯甲烷，三氯甲烷 |
|
31 |
鹽酸特比萘芬 |
在甲醇或乙醇中易溶，在水中微溶或極微溶解，在乙醚中幾乎不溶。 |
二甲基 亞砜 |
頂空法 |
85℃ 30min |
甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯 |
|
32 |
鹽酸伊托必利 |
在水中極易溶解，在甲醇中易溶，在乙醇中略溶，在三氯甲烷中微溶。 |
二甲基 亞砜 |
直接進(jìn)樣法 |
/ |
三氯甲烷、甲苯 |
|
33 |
鹽酸多柔比星 |
在水中溶解，在甲醇中微溶。 |
二甲基 亞砜 |
頂空法 |
90℃ 30min |
甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷 |
|
34 |
鹽酸齊拉西酮 |
在N，N-二甲基甲酰胺或甲醇中微溶，在二氯甲烷、無(wú)水乙醇或水中不溶。 |
二甲基 亞砜 |
直接進(jìn)樣法 |
/ |
甲醇、乙醇、正己烷、N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、甲苯、四氫呋喃 |
|
35 |
鹽酸羅哌卡因 |
在乙醇中易溶，在水中溶解，在乙醚中幾乎不溶。 |
二甲基 亞砜 |
頂空法 |
110℃ 20min |
乙醇、丙酮、異丙酮、三氯甲烷、甲苯、N，N-二甲基甲酰胺 |
|
36 |
鹽酸帕羅西汀 |
在甲醇中易溶，在乙醇中溶解，在丙酮中微溶，在水中極微溶解。 |
二甲基 亞砜 |
頂空法 |
90℃ 30min |
甲醇、乙醇、丙酮、四氫呋喃、吡啶、甲苯 |
|
37 |
鹽酸法舒地爾 |
在水中易溶，在甲醇中溶解，在乙醇中微溶，在三氯甲烷中幾乎不溶 |
二甲基 亞砜 |
直接進(jìn)樣 |
/ |
N，N-二甲基 甲酰胺 |
-END-
關(guān)于我們：
固體制劑事業(yè)部做為公司核心板塊之一，致力并搭建藥物緩釋、控釋、靶向制劑及微囊、固體分散體、包合、速溶技術(shù)、難溶性藥物等多項(xiàng)制劑技術(shù)平臺(tái)，在多領(lǐng)域藥物研發(fā)積累了豐富經(jīng)驗(yàn)。固體制劑事業(yè)部目前在研項(xiàng)目50余個(gè)，每年能夠完成近20個(gè)項(xiàng)目的申報(bào)，開(kāi)發(fā)品種涉及片劑、膠囊劑、顆粒劑等多個(gè)劑型，覆蓋心腦血管用藥、抗腫瘤、抗生素、老年性疾病用藥、消化系統(tǒng)等多個(gè)領(lǐng)域。
公司擁有雄厚的固體制劑藥品研發(fā)實(shí)力，豐富的資源：
專家顧問(wèn)團(tuán)隊(duì)，由業(yè)內(nèi)知名專家組成，對(duì)NMPA政策法規(guī)解讀深入，協(xié)助合理把控項(xiàng)目，技術(shù)支持到位；
體內(nèi)外橋接團(tuán)隊(duì)，由資深國(guó)際化藥劑學(xué)科學(xué)家領(lǐng)導(dǎo)，以臨床目標(biāo)指導(dǎo)制劑開(kāi)發(fā)，降低BE風(fēng)險(xiǎn)；
制劑開(kāi)發(fā)團(tuán)隊(duì)，制劑開(kāi)發(fā)經(jīng)驗(yàn)豐富，配置數(shù)百平米的專業(yè)實(shí)驗(yàn)室，國(guó)內(nèi)外先進(jìn)制劑設(shè)備，可實(shí)現(xiàn)片劑、膠囊劑、顆粒劑等多劑型產(chǎn)品的制備及檢測(cè)；
產(chǎn)業(yè)化團(tuán)隊(duì)，具有豐富的工廠生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)室研究經(jīng)驗(yàn)，為實(shí)現(xiàn)制劑由實(shí)驗(yàn)室研究轉(zhuǎn)化為工廠規(guī)模化生產(chǎn)保駕護(hù)航；
中試車間，擁有GMP認(rèn)證的制劑中試車間，為高質(zhì)量的新藥研究提供基礎(chǔ)保障。
我公司為客戶提供以產(chǎn)業(yè)化為核心的具有全球化技術(shù)水準(zhǔn)的藥學(xué)技術(shù)服務(wù)，為讓中國(guó)新藥技術(shù)和生產(chǎn)工藝與世界同步而努力。
110102000668（1）號(hào)